Цельная консервированная донорская кровь
Цельная консервированная донорская кровь - венозная кровь, заготовленная на утвержденных консервирующих растворах от здоровых доноров крови. В литературе нередко обозначается как «цельная кровь», «донорская кровь», «кровь консервированная донорская» и пр. Цельная консервированная донорская кровь представляет собой неоднородную полидисперсную жидкость с взвешенными форменными элементами. Одна единица консервированной крови, как правило, содержит 63 мл консерванта и около 450 мл донорской крови. Общий объем 513 мл. Плотность крови 1,056-1,064 -у мужчин и 1,051-1,060 -у женщин. Гематокрит цельной консервированной крови должен составлять 36-44 %.
Лица, пожелавшие сдать кровь, - доноры обязательно регистрируются, подвергаются медицинскому и лабораторному обследованию строго в соответствии с требованиями. Заготовленная кровь и ее компоненты этикетируются, документируются и подвергаются контролю качества.
Для забора крови и переработки ее на компоненты используются исключительно одноразовые стерильные системы, что позволяет полностью исключить заражение донора гепатитом, СПИДом, сифилисом или другими гемотрансмиссивными инфекциями.
Забор крови производится в специальную закрытую стерильную систему, состоящую из пластиковых контейнеров, содержащих специальные растворы для консервации крови, соединенных между собой пластиковыми трубками.
В реальном масштабе времени консервированная кровь в течение 24 ч с момента ее забора практически недоступна. Этот период времени необходим для соответствующей сертификации и маркирования, что включает в себя комплекс лабораторных методов исследования, направленных на обеспечение максимальной трансфузиологической безопасности пациента от гемотрансмиссивных инфекций и иммунологических осложнений.
Важно знать, что ни один из известных гемоконсервантов не позволяет сохранять полноценно все свойства крови. Страдает кислородно – транспортная функция эритроцитов. После переливания консервированной крови длительных сроков хранения (10 суток и более) эта функция эритроцитов in vivo восстанавливается через 16-18 ч. В консервированной крови к последнему дню хранения остаются жизнеспособными 70-80 % эритроцитов.
Активность факторов свертывания уменьшается по мере увеличения сроков хранения, и через 6-7 ч хранения активность факторов V и VII практически сведена к нулю. В связи с этим цельная консервированная кровь должна быть переработана на компоненты в течение 6 ч с момента забора крови.
В процессе стабилизации и хранения донорской крови накапливаются высвобождающийся при разрушении клеток свободный гемоглобин и калий; нарастает уровень аммиака и молочной кислоты; снижается рН крови; эритроциты изменяют свою форму, частично теряют свой электрокинетический потенциал, что способствует образованию микроагрегатов. В результате совокупных изменений до 25 % клеточных элементов консервированной крови после переливания депонируются и секвестируются в микроциркуляторном русле, что делает ее использование при острой кровопотере и анемии нецелесообразным.
Таким образом, наличие продуктов распада лейкоцитов и тромбоцитов, микро- и макроагрегатов в консервированной донорской крови в процессе хранения и особенности ее заместительного действия делают переливание цельной крови нецелесообразным, а переработку ее на компоненты крайне актуальной. Переливание донорской крови оправдано лишь при массивной кровопотере (в объеме более 30 – 40%% ОЦК), заменной гемотрансфуии при отсутствии необходимых компонентов и препаратов крови.
Компоненты крови
ЭРИТРОЦИТАРНАЯ МАССА
Эритроцитная масса – устаревший компонент крови, который получается из цельной консервированной крови, путем центрифугирования и дальнейшего удаления плазмы, а также лейкоцитов и тромбоцитов.
В состав эритроцитной массы входят непосредственно эритроциты, а именно 70-80 процентов от общей массы, плазма, которая составляет 20-30% и примесь лейкоцитов и тромбоцитов. Гематокрит эритроцитной массы напрямую зависит от первоначальных гематологических данных донора, и составляет в среднем 65-80%. Помимо этого на гематокрит влияют такие параметры, как консервирующий раствор и метод получения эритроцитной массы.
С целью улучшения реологических свойств эритроцитной массы непосредственно перед трансфузией в контейнер с кровью добавляют 50-100 мл 0,9 %-ного раствора хлорида натрия.
В основном эритроцитная масса используется при терапии анемических состояний. С целью правильного хранения эритроцитную массу рекомендуется хранить при температуре от + 4 до + 6 градусов по Цельсию. Срок хранения эритроцитной массы, законсервированной на CPD, составляет двадцать один день, а на консерванте CPDA-I - тридцать пять дней.
Эритроцитная масса не применяется в случае, если кровопотери больного составляют от 10 до 15%, а также уровень гематокрита, гемоглобина находится в норме. С целью возместить кровопотери и для поддержания стабильной гемодинамики таким пациентам необходимо ввести кровезаменители. Эритроцитную массу не применяют при остром септическом эндокардите, прогрессирующем развитии диффузного гломерулонефрита, хронической почечной, хронической и острой печеночной недостаточности, декомпенсации кровообращения, пороках сердца в стадии декомпенсации, остром ревматизме, гипертонической болезни Зет.
ЭРИТРОЦИТНОЙ ВЗВЕСИ
ЭРИТРОЦИТНОЙ ВЗВЕСИ - компонента донорской крови, из которого удалена плазма, а эритроциты содержатся в специальном питательном растворе SAGM (содержит хлорид натрия, аденин, глюкозу и маннитол, растворенные в воде). Гематокрит эритроцитной взвеси не превышает 70%, что обеспечивает сохранность эритроцитов и хорошие реологические свойства компонента. Эритроцитную взвесь переливают без предварительного разведения физиологическим раствором. Уникальный биохимический состав взвешивающего раствора обеспечивает сохранность функциональных свойств эритроцитов. Срок хранения эритроцитной взвеси - 42 суток.
Преимущество эр. взвеси перед эр. массой:
Гематокрит ≤ 0,70 (сохранность эритроцитов, реология)
Не надо разводить
Сохранность до 42 суток (PAGGS - до 56 суток)
Нет плазмы. Нет аллергии, ТРАЛИ
Максимальный выход плазмы
В плазме нет аденина
Показания к применению эритроцитной взвеси:
1.Острые постгеморрагические анемии (травмы, сопровождающиеся кровопотерей; желудочно-кишечные кровотечения, кровопотери при хирургических операциях, родах).
2. Тяжелые формы железодефицитных анемий (особенно у пожилых лиц, при выраженных изменениях гемодинамики).
3. Анемии, сопровождающие хронические заболевания желудочно-кишечного тракта и других органов и систем, интоксикации при ожогах, отравлениях, гнойной инфекции и др.
4. Анемии, сопровождающие депрессию эритропоэза (острые и хронические лейкозы, апластический синдром, миеломная болезнь, почечная недостаточность).
5. При подготовке больных с анемией к хирургическим вмешательствам, когда предполагается большая кровопотеря.
Противопоказания к применению эритроцитной взвеси:
1. Гипокоагуляционные состояния.
2. Тромбоэмболии различного генеза.
3. Приобретенная негемолитическая анемия.
Эритроцитная масса с удаленным лейкотромбослоем.
При приготовлении этого гемокомпонента после центрифугирования удаляется плазма и от 20 до 60 мл поверхностного слоя клеток. Некоторое количество плазмы возвращается, чтобы достичь величины гематокрита 0,65 – 0,75.
Эти трансфузионные среды необходимы при проведении заместительной терапии у много рожавших женщин, у лиц с отягощенным трансфузионным анамнезом. Использование эритроцитной массы, обедненной лейкоцитами и тромбоцитами снижает риск передачи вирусных инфекций (вируса иммунодефицита человека, цитомегаловируса). Существующие в настоящее время специальные лейкоцитарные фильтры позволяют эффективно удалять из эритроцитной массы белки плазмы, микроагрегаты, тромбоциты и лейкоциты (эритроцитная масса фильтрованная)
Отмытые эритроциты
Отмытые эритроциты – компонент крови, полученный из цельной крови центрифугированием и удалением плазмы с последующим отмыванием эритроцитов изотоническим раствором.
Отмытые эритроциты – взвесь эритроцитов, из которой в основном удалены плазма, лейкоциты и тромбоциты. Гематокрит – от 65% до 75%. В каждой дозе по окончании переработки должно содержаться не менее 40 г гемоглобина.
Отмытые эритроциты показаны для замещения эритроцитов у пациентов с антителами к белкам плазмы, а также у пациентов с тяжелыми посттрансфузионными аллергическими реакциями, у пациентов с печеночной и почечной недостаточностью.
Фильтрованные эритроциты
При проведении гемотрансфузий (особенно многократно), могут возникать посттрансфузионные осложнения, которые чаще связывают с лейкоцитами (в меньшей степени с тромбоцитами),
находящимися в гемотрансфузионных средах. Аллогенные (чужеродные) лейкоциты - носители высокоиммуногенных антигенов (системы НLA и специфичных), могут стать причиной возникновения
у реципиента посттрансфузионных негемолитических температурных реакций, острой легочной недостаточности, вызвать аллоиммунизацию, рефрактерность к тромбоцитам, иммуносупрессию,
а также стать источником лейкоцит-ассоциированных вирусных инфекций.
Наличие в эритроцитных средах плазмы также далеко не безразлично для больного. Несовместимость донора и реципиента по белкам плазмы может проявляться аллергическими,
анафилактоидными и анафилактическими осложнениями.
В связи с этим, для снижения иммуногенности и реактогенности эритроцитных сред, их подвергают дополнительной «очистке» с помощью лейкофильтрации или отмывания.
Освобождение (обеднение) эритроцитсодержащих сред от лейкоцитов, тромбоцитов, остатков плазмы, микроагрегатов имеет важное значение в клинической трансфузиологии.
Процедура отмывания и/или фильтрации эритроцитов не влияет на качество и функциональные свойства получаемой продукции, а удаление лейкоцитов составляет 99,5-99,9%,
плазмы - более 90% от исходного количества.
Основные преимущества
применения лейкоредуцированных (обедненных лейкоцитами) эритроцитных сред:
1. Снижение риска развития посттрансфузионных реакций и осложнений (т.к. уменьшается риск сенсибилизации больных клеточными элементами и белками плазмы);
2. Снижение риска передачи инфекционных и вирусных заболеваний (ВИЧ, вирусных гепатитов, цитомегаловирусной инфекции, вируса Эпштейна-Барра).
3. Профилактика аллоиммунизации, болезни «трансплантат-против-хозяина», иммуносупрессии и др. Применение лейкоредуцированных эритроцитсодержащих сред рекомендовано:
Больным, имеющим отягощённый трансфузиологический анамнез (при имевшихся ранее реакциях и осложнениях на гемотрансфузиях);
Больным, имеющим отягощённый аллергологический и акушерский анамнез;
Пациентам с предшествующими или предстоящими многократными переливаниями крови и ее компонентов;
Беременным, при родах и послеродовом периоде;
В педиатрической практике (особенно новорожденным, детям до 3-х месяцев);
Иммуносупрессивным пациентам (онкологические больные, при трансплантации органов и тканей, лицам старше 65 лет);
Пациентам при высокой вероятности развития респираторного дистресс-синдрома (кардиохирургия);
Больным с гематологическими заболеваниями;
Условия хранения .
Лейкоредуцированные эритроцитные среды (взвесь с физиологическим раствором и эр.среды фильтрованные) храняться при температуре от +2 до +6 C. Срок хранения указан на этикетке мешка
с гемотрансфузионной средой.
Заявка и получение.
Плановые заявки на приготовление эритроцитной взвеси с физиологическим раствором (отмытых эритроцитов) или эр.взвеси фильтрованной принимаются экспедицией.
В ночное время данные трансфузионные среды изготавливаются только по экстренным показаниям на основании заявки с обоснованием экстренности.
Пробирки с образцами крови реципиентов для индивидуального подбора необходимо доставлять в течение 1 часа после подачи заявки в экспедицию.
Заказ на приготовление данных сред оформляется в письменном виде (ф. заявки 421/у приказ МЗ СССР № 1055 от 07.08.1985г. «Об утверждении форм первичной
медицинской документации для учреждений службы крови») с информацией:
Наименование учреждения здравоохранения, отделения;
Наименование трансфузионной среды;
Количество (в мл или дозах);
Ф.И.О. реципиента, возраст, диагноз, № медицинской карты, группа крови по системе АВ0, резус-принадлежность, фенотип по системе резус;
Срок исполнения; обоснование экстренности;
Ф.И.О., должность заявителя.
Допускается заказ на приготовление отмытых и фильтрованных эритроцитов по телефону 40-51-53(экспедиция). Он должен быть продублирован в письменном виде в течение 12 часов.
При получении продукции заявка (ф.421/у) прилагается к требованию-накладной (ф. М-11).
Применение.
Переливание эритроцитных сред, обедненных лейкоцитами, осуществляется в соответствии с «Инструкцией по применению компонентов крови»
(Приказ МЗ РФ № 363 от 25 ноября 2002г.) с дополнениями от 11 января 2005г.
Эритроцитарная масса (ЭМ) - компонент крови, который состоит из эритроцитов (70-80%) и плазмы (20-30%) с примесью лейкоцитов и тромбоцитов (гематокрит - 65- 80%). По содержанию эритроцитов одна доза эритроцитарной массы (270 ± 20 мл) эквивалентна одной дозе (510 мл) крови.
Выделяют 6 видов эритроцитарной массы (эритроцитарная масса, фильтрованная; эритроцитарная масса, гамма-облученная; эритроцитарная масса, обедненная лейкоцитами и тромбоцитами; эритроцитарная масса с удаленным лейкотромбослоем; эритроцитарная масса с удаленным лейкотромбослоем, фильтрованная; эритроцитарная масса с удаленным лейкотромбослоем, гамма-облученная) и несколько видов ауто эритроцитарная масса (ауто-ЭМ; аутоЭМ, фильтрованная; аутоЭМ, гамма-облученная, и др).
Эритроцитарная взвесь (ЭВ) представляет собой эритроцитарную массу, ресуспендированную в специальном растворе натрия хлорида и гемоконсерванта, содержащего препараты желатина, и некоторые другие компоненты. Как правило, соотношение эритроцитарной взвеси и раствора составляет 1: 1. Эритроцитарная взвесь, приобретая более высокую текучесть и соответственно более высокие реологические свойства, одновременно имеет более низкое гематокритное число (40-50%).
Выделяют 5 видов эритроцитарной взвеси (эритроцитарная взвесь с физиологическим раствором, эритроцитарная взвесь с ресуспендирующим раствором, эритроцитарная взвесь с ресуспендирующим раствором, фильтрованная, эритроцитарная взвесь с ресуспендирующим раствором, гамма-облученная, эритроцитарная взвесь, размороженная и отмытая).
Эритроцитарная масса, обедненная лейкоцитами и тромбоцитами (отмытые эритроциты - (ОЭ) представляет собой эритроцитарную массу, лишенную плазмы, а также лейкоцитов и тромбоцитов путем 1-5-кратного повторного добавления физиологического раствора и удаления надосадочной жидкости после центрифугирования. Отмытые эритроцитарные массы сохраняются до использования во взвеси 100-150 мл физиологического раствора с гематокритом 0,7-0,8 (70-80%).
Для удаления лейкоцитов из цельной консервированной крови или эритроцитарной массы активно используют специальные фильтры, которые позволяют удалять более 99% лейкоцитов, что позволяет резко уменьшить число посттрансфузионных реакций негемолитического типа и тем самым повысить эффект лечебных процедур.
Эритроцитарная взвесь, размороженная и отмытая,- метод замораживания и хранения эритроцитов при низких температурах (до 10 лет) позволяет получить после размораживания и отмывания от криопротектора (глицерола) функционально полноценные эритроциты. В замороженном состоянии эритроциты могут находиться до 10 лет.
Так же, как и с донорской кровью, более целесообразно как с медицинской, так и с экономической точек зрения заготавливать вместо цельной консервированной аутокрови ее компоненты - аутологичные (аутогенные) гемокомпоненты: эритроцитарную массу, свежезамороженную плазму (СЗП), в отдельных случаях тромбоконцентрат. При адекватной медикаментозной подготовке пациента (препараты железа, витаминотерапия, эритропоэтин) за 2-3 недели до операции можно заготовить от 600-700 до 1500-18 000 мл аутоСЗП, 400-500 мл аутоЭМ.
В ряде случаев из аутоЭМ получают аутоЭВ с физиологическим раствором или при дополнительной фильтрации - аутоЭВ с ресуспендирующим раствором, фильтрованную.
, , , ,
Эритроцитарная масса: место в терапии
Эритроцитарная масса назначается с целью купирования анемии для усиления оксигенирующей функции крови. В отличие от консервированной крови, применение ЭМ значительно снижает вероятность иммунизации больного белками плазмы, лейкоцитами и тромбоцитами донорской крови.
У больных с нормальными исходными показателями гемоглобина, гематокрита и белков плазмы при кровопотере в пределах 10-15% ОЦК нет необходимости применения ЭМ. Поддерживать стабильную гемодинамику и возместить кровопотерю достаточно кровезаменителями.
При кровопотере более 15-20% ОЦК, как правило, наблюдаются первые признаки нарушения кислородтранспортной функции крови, что требует адекватного восполнения дефицита эритроцитов, т.е. применения ЭМ. Трансфузии ЭМ, ЭВ могут производиться капельно или струйно.
Установить какие-либо абсолютные лабораторные критерии для назначения ЭМ не представляется возможным и вряд ли целесообразно. Прежде всего, необходимо учитывать клиническое состояние пациента, сопутствующую патологию, степень и место травмы, причину анемизации, время кровотечения и многие другие факторы. Так, известно, что больные с хронической анемией более адаптированы к низкому уровню гемоглобина. В то же время больные артериальной гипотензией, с выраженной сердечно-легочной недостаточностью, при инфекционных заболеваниях и др. требуют переливания ЭМ и при более высоких значениях показателей красной крови.
При хронических кровопотерях или при недостаточности кроветворения основанием для вливания эритроцитов в большинстве случаев является падение уровня гемоглобина крови ниже 80 г/л и гематокрита ниже 25% (0,25 л/л). Для улучшения реологических свойств ЭМ (или ЭК) непосредственно перед трансфузией возможно добавление в контейнер 50-100 мл 0,9% раствора натрия хлорида, что фактически превращает ее в ЭВ с физиологическим раствором. Показания к переливанию ЭВ, ОЭ, размороженных ОЭ аналогичны назначениям эритроцитарной массы:
- травматический и операционный шок, осложненный кровопотерей;
- анемическая гипоксия при нормо-гиповолемических состояниях;
- постгеморрагические анемии;
- в период подготовки больных с критически низкими показателями гемограммы к обширным хирургическим вмешательствам;
- посттермические (при ожоговой болезни) анемии.
Отмытая эритроцитарная масса применяется у пациентов, сенсибилизированных предыдущими гемотрансфузиями к плазменным факторам или антигенам лейкоцитов и тромбоцитов. Причиной большинства трансфузионных реакций негемолитического типа у больных, имевших в анамнезе множественные трансфузии компонентов крови, а также женщин, имевших беременности, являются изоантитела к антигенам лейкоцитов (в частности, HLA), которые, несомненно, снижают эффект не только перелитого компонента, но и всей лечебной процедуры. Отмывание эритроцитарной массы практически полностью устраняет плазму и элементы разрушенных клеток периферической крови, тромбоциты и резко снижает содержание лейкоцитов (
Показания к применению отмытых эритроцитов:
- анемии различной этиологии, сопровождающиеся сенсибилизацией реципиента к антигенам белков плазмы, лейкоцитов и тромбоцитов в результате повторных переливаний крови или беременности;
- синдром гомологичной крови (как элемент комплексной терапии);
- возмещение кровопотери у аллергических больных (бронхиальная астма и др.) с целью профилактики анафилактических реакций.
Трансфузии аутоЭМ в интра- и постоперативный период в целях коррекции анемии проводятся при наличии показаний.
, , , , , , , , , ,
Физиологические свойства эритроцитарной массы
Компоненты аутокрови - это части собственной крови больного, что и определяет их физиологические свойства - обеспечение тканей и клеток организма кислородом и доставка в легкие углекислого газа. После 8-10 дней хранения в эритроцитарной массе может обнаружиться незначительный гемолиз, который не является противопоказанием для ее клинического использования. Чем больше срок хранения, тем ниже кислородтранспортная функция эритроцитов. В эритроцитарных компонентах меньше, чем цельной крови, консерванта, в ОЭ он полностью отсутствует. Отмытая эритроцитарная масса содержит следовое количество белковых компонентов плазмы, тромбоцитов и лейкоцитов.
Фармакокинетика
Компоненты, содержащие донорские эритроциты, после гемотрансфузии в организме функционируют от нескольких дней до нескольких недель, что в значительной степени определяется сроками заготовки эритроцитов, видом консерванта и условиями их хранения (нативные, размороженные, отмытые). В организме разрушенные донорские эритроциты утилизируются клетками ретикуло-эндотелиальной системы паренхиматозных органов.
Противопоказания
Противопоказания к применению ЭМ и ЭВ: массивная кровопотеря (более 40% ОЦК), гипокоагуляционные состояния, тромбоэмболии различного генеза, приобретенная негемолитическая анемия.
Переносимость и побочные эффекты
При соблюдении правил заготовки, переработки, хранения и адекватного клиническому состоянию пациента применения донорских эритроцитов риск реакций и осложнений сводится к минимуму.
Согревание компонентов крови снижает риск гипотермии при массивных переливаниях охлажденных компонентов крови. Минимальная рекомендуемая температура переливаемой крови и ее компонентов - +35° С. При гемотрансфузии неподогретой крови или ее компонентов иногда можно наблюдать желудочковые аритмии (обычно не развиваются до снижения температуры тела ниже +28° С).
Различают пирогенные, аллергические, анафилактические, фебрильные (негемолитические) виды гемотрансфузионных реакций.
Посттрансфузионные реакции, как правило, не сопровождаются серьезными и длительными нарушениями функции органов и систем и не представляют непосредственной опасности для жизни больного. Они манифестируют, как правило, через 10-25 мин после начала гемотрансфузии, в отдельных случаях отмечаются после окончания гемотрансфузии и в зависимости от степени тяжести могут продолжаться от нескольких минут до нескольких часов.
Пирогенные реакции (гипертермия) возникают как следствие инфузии в кровеносное русло реципиента пирогенов вместе с консервированной кровью или ее компонентами. Пирогены - неспецифические протеины, продукты жизнедеятельности микроорганизмов. Посттрансфузионные пирогенные реакции могут возникать также у изосенсибилизирован-ных повторными гемотрансфузиями больных или у женщин, имевших в анамнезе неоднократную беременность при наличии антилейкоцитарных, антитромбоцитарных или антибелковых антител. Фильтрация крови через лейкофильтры и отмывание позволяет резко снизить риск изосенсибилизации пациентов при множественных гемотрансфузиях.
При возникновении пирогенных реакций появляется озноб, температура повышается до +39 или 40° С обычно через 1-2 ч после переливания крови, реже во время него. Лихорадка сопровождается головной болью, миалгией, дискомфортом в грудной клетке, болями в поясничной области. Клиническая картина может иметь различную степень выраженности. Гемотрансфузии достаточно часто протекают с субфебрильной температурой, которая обычно скоро проходит. Прогноз при пирогенных реакциях благоприятный. Клинические признаки исчезают через несколько часов.
Аллергические реакции различной степени выраженности отмечаются в 3-5% случаев гемотрансфузии. Как правило, они регистрируются у больных, сенсибилизированных предшествующими гемотрансфузиями или имевших в анамнезе повторные беременности с антителами к антигенам плазменных белков, лейкоцитов, тромбоцитов и даже Ig. У части больных аллергические реакции наблюдаются уже при первом переливании гемокомпонентов и не связаны с предшествующей изосенсибилизацией. Полагают, что в таких случаях эти реакции обусловлены наличием «спонтанных» антител к Ig и ответом IgE тучных клеток реципиента на перелитый специфический антиген донора, который часто ассоциирован с тромбоцитами или плазменными белками.
Аллергические реакции могут возникать как во время переливания крови или ее компонентов, так и отсрочено, спустя 1-2 ч после окончания процедуры. Характерный признак аллергической посттрансфузионной реакции - аллергическая сыпь, нередко в сопровождении зуда. При более тяжелом течении реакции - озноб, головные боли, лихорадка, боли в суставах, диарея. Следует иметь в виду, что аллергическая реакция может протекать с симптомами анафилактического характера - нарушением дыхания, цианозом, иногда - с быстрым развитием отека легких. Одним из самых грозных осложнений гемотрансфузии является анафилактическая реакция, иногда молниеносно развивающаяся до анафилактического шока.
По тяжести клинического течения (температуры тела и длительности проявления) выделяют три степени посттрансфузионных реакций: легкие, средние, тяжелые.
Легкие реакции характеризуются незначительным повышением температуры, головной болью, небольшим ознобом и недомоганием, болями в мышцах конечностей. Эти явления, как правило, кратковременны - 20-30 мин. Обычно для их купирования не требуется каких-либо специальных лечебных мероприятий.
Среднетяжелые реакции - отмечаются учащение пульса и дыхания, повышение температуры на 1,5-2° С, нарастающий озноб, иногда проявляется крапивница. В большинстве случаев медикаментозная терапия не требуется.
Тяжелые реакции - цианоз губ, рвота, сильная головная боль, боль в пояснице и костях, одышка, крапивница или отеки (типа Квинке), температура тела повышается более чем на 2° С, наблюдается потрясающий озноб, лейкоцитоз. Необходимо как можно скорее приступать к медикаментозной коррекции гемотрансфузионного осложнения.
Владельцы патента RU 2495568:
Изобретение относится к медицине. Проводят получение донорской крови, смешивание с гемоконсервантом глюцир в соотношении 4:1, разделение донорской крови на плазму и эритроцитную массу с последующим хранением эритроцитной массы в течение 30 суток при t=+4°С. Дополнительно в состав гемоконсерванта вводят 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малат. Изобретение позволяет повысить эффективность защиты клеточных мембран эритроцитов, ограничить процесс гемолиза, предупредить образование микросгустков на поздних сроках хранения эритроцитарной массы. 1 з.п. ф-лы, 6 табл., 5 пр.
Изобретение относится к медицине, а именно, к фармакологии и трансфузиологии, и может быть использовано для консервирования эритроцитарной массы и хранения донорских эритроцитов до 30 суток при t=+4°С.
Консервирование донорской крови и эритроцитарной массы проводится с использованием гемоконсервантов и дополнительных веществ, способствующих укреплению клеточной мембраны эритроцитов, в качестве которых используются вещества, уплотняющие мембрану и частично обезвоживающие ее (сахароза, маннит, сорбит), а также коллоидные препараты (растворы желатина, поливинилпирролидона), которые, обволакивая эритроцитную мембрану, повышают ее стабильность при консервировании (Шевченко Ю.Л., Шабалин В.Н., Заривчатский М.Ф., Селиванов Е.А. «Руководство по общей и клинической трансфузиологии.» - Спб: ООО «Фолиант», 2003, с.127-128.).
Недостатком существующего способа является значительное снижение эффективности: отсутствие влияния на процессы перекисного окисления липидов и образование свободных радикалов при хранении донорских эритроцитов, что неизбежно приводит к ускоренному старению клеток.
Также известен способ консервирования донорской крови путем дополнительного введения 3-окси-6-метил-2-этилпиридина сукцината (мексидола, далее ОПС) в состав стандартного гемокон-серванта глюгицир в концентрации 0,25 мг/мл глюгицира. При этом консервант содержит в 1 литре воды натрия гидроцитрат двузаме-щенный 20 г, глюкозы безводной 30 г, а также дополнительно ОПС 0,25 г. Соотношение крови и консерванта 4:1 (Патент РФ №2410103).
Недостатком данного способа, несмотря на успешную коррекцию процессов перекисного окисления липидов в донорской крови и повышение ее качества по сравнению с кровью, консервированной только с использованием глюгицира, является снижение защитной активности заявленной комбинации глюгицира ОПС к 14-ым, 21-ым и 30-ым суткам хранения донорской крови.
Целью изобретения является более эффективная защита клеточных мембран эритроцитов, в большей степени ограничение процессов гемолиза и предупреждение образование микросгустков на поздних сроках хранения эритроцитарной массы (14-21-30 сутки).
Поставленная цель решается дополнительным введением 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малата (этоксидола, далее ОПМ) в состав гемоконсерванта глюгицир в концентрации 0,25 мг/мл глюгицира. Консервант содержит в 1 литре воды натрия гидроцитрат двузамещенный 20 г, глюкозы безводной 30 г, ОПМ 25 г. Соотношение крови и консерванта 4:1.
Технический результат заключается в повышении качества эритроцитарной массы при ее хранении до 14-21-30 суток. Консервант позволяет сохранить морфофункциональную полноценность эритроцитов в течение 30 суток.
Изобретение иллюстрируются следующими примерами.
Исследование влияния ОПМ проводилось в образцах эритро-цитной массы, заготовленной на гемоконсерванте глюгицир, который содержал 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл ОПМ.
Контролем служила эритроцитарная масса, заготовленная на глюгицире без добавок.
Серией сравнения явились образцы донорской эритроцитарной массы, заготовленной на гемоконсерванте глюгицир, который содержал 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл ОПС.
Исследования ряда показателей, отражающих качество эритроцитов, проводили в образцах эритроцитарной массы сразу после заготовки, затем, в процессе хранения при t=+4°С через 7 суток, 14 суток, 21 сутки и 30 суток.
Влияние ОПМ на морфо-функциональную полноценность донорских эритроцитов исследовали путем определения содержания свободного гемоглобина бензидиновым методом, доли осмотически неустойчивых эритроцитов (по содержанию свободного гемоглобина после помещения эритроцитов в 0,6% раствор натрия хлорида), количества микросгустков (подсчет под микроскопом), определяли процент гемолиза, среднего объема эритроцита (MCV) и ширины распределения эритроцитов (анизоцитоз) на гематологическом анализаторе МЕК-6410К (Япония).
Хранение донорской эритроцитной массы сопровождается увеличением проницаемости клеточной мембраны, ростом осмотической неустойчивости эритроцитов и увеличением содержания свободного гемоглобина, нарастанием количества микросгустков.
На сроках хранения свыше 7 суток в образцах эритроцитарной массы с добавлением ОПМ наблюдалось достоверно более значительное снижение количества микросгустков во всех изученных дозах (0,25 мг/мл, 0,5 и 1,0 мг/мл глюгицира), чем при добавлении к глюгициру ОПС. Так, при использовании препарата в концентрации 0,25 мг/мл показатель снижался относительно данных контроля на 14-е сутки 48%, на 21-е сутки - 47% и на 30-е сутки хранения - на 50% и был меньше серии сравнения, соответственно, на 41%, 31% и 34%.
При использовании для добавления к глюгициру ОПМ в концентрации 0,5 мг/мл количество микросгустков в образцах эритроцитарной массы снижалось по сравнению с контролем к 14-м суткам на 41%, к 21-м - на 47% и к 30-м - на 52%, в том числе, по сравнению с показателями серии сравнения (с применением ОПС в соответствующей концентрации), на 33%, 30% и 46%, соответственно.
ОПМ в концентрации 1,0 мг/мл позволило ограничить рост количества микросгустков на 14-е, 21-е и 30-е сутки хранения на 41%, 34% и 47%, соответственно, по сравнению с контрольными данными. Кроме того, показатель был ниже серии сравнения на 34%, 14% и 41%.
| Таблица 1. | |||||
| Влияние ОПС и ОПМ на количество микросгустков (в 10 6 л) при хранении эритроцитной массы (n=20). | |||||
| Метод коррекции | |||||
| исход | 7 сут. | 14 сут. | 21 сут. | 30 сут. | |
| (контроль) | 4,500±0,224 | 47,30±1,14 | 145,45±1,60 | 198,8±6,35 | |
| 3-ОПС | 1,01±0,04∗ | 41,9±0,73∗ | 111,4±1,48∗ | 151,7±1,73∗ | |
| 0,25 мг/мл | |||||
| 3-ОТП | 2,587±0,112∗# | 24,73±0,712∗# | 77,39±1,95∗# | 100,13±1,46∗# | |
| 0,25 мг/мл | |||||
| 3-ОПС | 0,000±0,001 | 0,91±0,04∗ | 41,7±0,42∗ | 110,6±1,26∗ | 176,7±2,25∗ |
| 0,5 мг/мл | |||||
| 3-ОПМ | 2,787±0,107∗# | 27,933±0,530∗# | 77,200±1,797∗# | 94,75±1,98∗# | |
| 0,5 мг/мл | |||||
| 3-ОПС | 0,90±0,05∗ | 42,2±0,62∗ | 111,5±1,72∗ | 177,7±2,07∗ | |
| 1,0 мг/л | |||||
| 3-ОПМ | 2,693±0,111∗# | 27,800±0,500∗# | 96,41±2,13∗# | 105,59±0,89∗# | |
| 1,0 мг/мл | |||||
| <0,05 по сравнению с данными контроля соответствующего срока наблюдения; # - по сравнению с данными при введении ОПС соответствующей концентрации и срока наблюдения. |
Минимальное содержание микросгустков определялось в образцах с добавлением ОПМ в концентрации 0,5 мг/мл. Динамические изменения гематологических показателей эритроцитов, свидетельствуют о целесообразности применения ОПМ при консервировании эритроцитарной массы (табл.1).
Уровень свободного гемоглобина на 7-е сутки хранения донорской эритроцитарной массы на фоне добавления к консерванту ОПМ в концентрации 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл был ниже контрольных данных на 24%, 33% и 22%, соответственно, и достоверно не отличался от показателей группы сравнения с добавлением ОПС (табл.2).
К 14 суткам хранения эритроцитарной массы в образцах с добавлением к консерванту ОПМ уровень свободного гемоглобина был меньше контрольных данных на 20%, 42% и 27%. При этом в группе сравнения, где к консерванту глюгицир добавлялся ОПС в соответствующих дозах, достоверного снижения содержания свободного гемоглобина не наблюдалось (табл.2).
На 21 сутки хранения эритроцитарной массы с добавлением к консерванту глюгицир ОПМ уровень свободного гемоглобина был ниже показателей контроля на 58%, 69% и 61%, в то время как в серии сравнения с добавлением ОПС показатель снижался относительно контроля только при использовании концентрации 0,25 мг/мл на 34% (табл.2).
К 30-м суткам хранения донорской эритроцитарной массы наибольшее снижение уровня свободного гемоглобина наблюдалось при использовании концентрации ОПМ 0,5 мг/мл.
| Таблица 2. | |||||
| Влияние ОПМ на уровень свободного гемоглобина (г/л) при хранении эритроцитарной массы (М±m). | |||||
| Метод коррекции | |||||
| исход | 7 сут. | 14 сут. | 21 сут. | 30 сут. | |
| (контроль) | 0,051±0,001 | 0,079±0,007 | 0,206±0,008 | 0,583±0,018 | |
| 3-ОПС | 0,039+0,001∗ | 0,069±0,001 | 0,135±0,015∗ | 0,219±0,010∗ | |
| 0,25 мг/мл | |||||
| 3-ОПМ | 0,03910,001∗ | 0,063+0,003∗ | 0,086+0,002∗# | 0,301±0,007∗# | |
| 0,25 мг/мл | |||||
| 3-ОПС | 0,029+0,001 | 0,039+0,001∗ | 0,069±0,001 | 0,239±0,010 | 0,284+0,010∗ |
| 0,5 мг/мл | |||||
| 3-ОПМ | 0,034±0,002∗ | О,046±0,002∗# | 0,064±0,003∗# | 0,274±0,031∗ | |
| 0,5 мг/мл | |||||
| 3-ОПС | 0,039+0,001∗ | 0,069±0,001 | 0,239±0,010 | 0,284±0,010∗ | |
| 1,0 мг/л | |||||
| 3-ОПМ | 0,040±0,001∗ | Э,058±0,001∗# | 0,080+0,003∗# | 0,380±0,015∗# | |
| 1,0 мг/мл | |||||
| Примечание: ∗ - достоверность различий р<0,05 по сравнению с данными контроля соответствующего срока наблюдения; # - по сравнению с данными при введении ОПС соответствующей концентрации и срока наблюдения. |
Процент гемолиза в образцах донорской эритроцитарной массы снижался при добавлении ОПМ к консерванту глюгицир к 7 суткам хранения по сравнению с контролем на 52%, 69% и 70%, соответственно, при использовании концентрации ОПМ 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл. При этом показатель во всех исследованных концентрациях снижался достоверно в большей степени, чем при добавлении к глюгициру ОПС.
На 14 сутки хранения процент гемолиза также был ниже контроля на 64%, 69% и 63% при использовании концентрации ОПМ 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл, соответственно, и был достоверно меньше данных серии сравнения, где добавлялся ОПС, на 59%, 65% и 61%.
На 21 сутки хранения эритроцитарной массы процент гемолиза был ниже контрольных данных на 49% и 22% в образцах с использованием концентрации ОПМ 0,5 и 1,0 мг/мл. При этом более выраженное снижение процента гемолиза по сравнению с добавлением в консервант ОПС наблюдалось при использовании концентрации ОПМ 0,5 мг/мл (на 56%).
На 30-е сутки хранения эритроцитарной массы процент гемолиза был ниже контрольных данных на 46%, 58% и 48% в образцах с добавлением к консерванту ОПМ в концентрации 0,25 мг/мл, 0,5 мг/мл и 1,0 мг/мл. Причем, при использовании концентрации 0,5 мг/мл показатель был ниже данных группы сравнения на 19%.
Таким образом, процент гемолиза снижался в большей степени при различных сроках хранения эритроцитарной массы в образцах, где к консерванту глюгицир добавлялся ОПМ в концентрации 0,5 мг/мл.
| Таблица 3. | |||||
| Влияние ОПС и ОПМ на % гемолиза при хранении эритроцитарной массы (М±m). | |||||
| Метод коррекции | Сроки хранения эритроцитной массы, сут. | ||||
| Исход | 7 сут. | 14 сут. | 21 сут. | 30 сут. | |
| (контроль) | 0,113±0,003 | 0,175±0,015 | 0,458±0,017 | 1,456±0,044 | |
| 3-ОПС | 0,085±0,002∗ | 0,153+0,003 | 0,29910,034∗ | 0,54510,024∗ | |
| 0,25 мг/мл | |||||
| 3-ОПМ | 0,054±0,006∗# | 0,063±0,003∗# | 0,398±0,071 | 0,793±0,021∗# | |
| 0,25 мг/мл | |||||
| 3-ОПС | 0,058±0,002 | 0,089±0,004∗ | 0,157±0,004 | 0,53010,021 | 0,75010,038 ∗ |
| 0,5 мг/мл | |||||
| 3-ОПМ | 0,035±0,002∗# | 0,055±0,006∗# | 0,235±0,013∗# | 0,61±0,06∗# | |
| 0,5 мг/мл | |||||
| 3-ОПС | 0,08710,002∗ | 0,166±0,008 | 0,51410,025 | 0,71110,025∗ | |
| 1,0 мг/л | |||||
| 3-ОПМ | 0,034±0,002∗# | 0,065±0,004∗# | 0,357±0,064# | 0,756±0,033∗ | |
| 1,0 мг/мл | |||||
| Примечание: ∗ - достоверность различий р<0,05 по сравнению с данными контроля соответствующего срока наблюдения; # - по сравнению с данными при введении ОПС соответствующей концентрации и срока наблюдения. |
Доля осмотически неустойчивых эритроцитов снижалась по сравнению с контролем на всех сроках наблюдения при добавлении к консерванту глюгицир ОПМ в изученных концентрациях (табл.4). При этом при добавлении ОПМ в концентрации 0,5 мг/мл показатель не отличался от данных серии сравнения, а в концентрации 1,0 мг/мл был ниже, чем при добавлении ОПС на 32%, 7% и 17% на сроках хранения 14, 21 и 30 суток.
| Таблица 4. | |||||
| Влияние ОПМ на долю осмотически неустойчивых эритроцитов (%) при хранении эритроцитной массы (n=20). | |||||
| Метод коррекции | Сроки хранения эритроцитной массы. | ||||
| исход | 7 сут. | 14 сут. | 21 сут. | 30 сут. | |
| (контроль) | 7,45±0,11 | 12,24+0,12 | 16,97+0,09 | 22,905+0,36 | |
| 3-ОПС | 3,54±0,08∗ | 5,09+0,07* | 11,33±0,16∗ | 13,84±0,15∗ | |
| 0,25 мг/мл | |||||
| 3-ОПМ | 3,93±0,07∗ | 7,35±0,13∗# | 12,28+0,18∗# | 14,11+0,10∗ | |
| 0,25 мг/мл | |||||
| 3-ОПС | 0,03 7±0,003 | 3,50±0,07∗ | 4,98±0,08∗ | 11,32±0,14∗ | 13,57±0,11∗ |
| 0,5 мг/мл | |||||
| 3-ОПМ | 3,47+0,11∗ | 4,93+0,11∗ | 11,43+0,20∗ | 13,67+0,16∗ | |
| 0,5 мг/мл | |||||
| 3-ОПС | 3,94±0,06∗ | 7,45±0,08∗ | 12,24+0,13∗ | 16,99+0,11∗ | |
| 1,0 мг/л | |||||
| 3-ОПМ | 3,60+0,11∗ | 5,07±0,07∗# | 11,43±0,20∗# | 14,03+0,21∗# | |
| 1,0 мг/мл | |||||
| Примечание: ∗ - достоверность различий р<0,05 по сравнению с данными контроля соответствующего срока наблюдения; # - по сравнению с данными при введении ОПС соответствующей концентрации и срока наблюдения. |
На всех сроках хранения эритроцитарной массы при добавлении к консерванту глюгицир ОПМ в изученных концентрациях наблюдается уменьшение процессов анизоцитоза (табл.5) и ограничение роста объема эритроцитов (табл.6). При этом предотвращается увеличение ширины распределения размеров эритроцитов и их объема свыше нормы при хранении образцов донорской эритроцитарной массы до 30 суток, в то время как в контроле в 80% случаев на поздних сроках хранения наблюдается увеличение размеров эритроцитов.
| Таблица 5. | ||||||||
| Влияние ОПС и ОПМ на анизоцитоз (ширина распределения эритроцитов) (%CV) при хранении эритроцитарной массы (М±m). | ||||||||
| Метод коррекции | Сроки хранения эритроцитной массы, сут. | |||||||
| исход | 7 сут. | 14 сут. | % | 21 сут. | % | 30 сут. | % | |
| (контроль) | 14,23±0,17 | 15,66±0,06 | 0 | 16,22±0,05 | 10 | 17,02+0,1 0 | 80 | |
| 3-ОПМ 0,25 мг/мл | 12,68+0,12∗ | 13,65±0,27∗ | 0 | 13,72+0,29∗ | 0 | 14,52±0,31∗ | 0 | |
| 3-ОПМ 0,5 мг/мл | 10,90 ±0,16 | 12,28+0,24∗ | 13,65+0,27∗ | 0 | 13,72+0,29∗ | 0 | 14,52±0,31∗ | 0 |
| 3-ОПМ 1,0 мг/мл | 13,06±0,34∗ | 14,27+0,19∗ | 0 | 14,25±0,61∗ | 0 | 14,73±0,61∗ | 0 | |
| Примечание: ∗ - достоверность различий р<0,05 по сравнению с данными контроля соответствующего срока наблюдения; % - процент эритроцитов, размеры которых превышают норму контроль - 21 сутки, контроль - 30 сутки. При добавлении ОПМ - 21 сутки. При добавлении ОПМ - 30 сутки. |
| Таблица 6. | ||||||||
| Влияние ОПС и ОПМ на средний объем эритроцитов (fl) при хранении эритроцитарной массы (М±m). | ||||||||
| Метод коррекции | Сроки хранения эритроцитной массы, сут. | |||||||
| Исход | 7 сут. | 14 сут. | % | 21 сут. | % | 30 сут. | % | |
| - (контроль) | 91,28±0,45 | 91,68±0,46 | 0 | 97,45+0,66 | 15 | 99,86+0,39 | 55 | |
| 3-ОПМ | 90,55±0,33 | 94,57±0,40 | 0 | 92,76±0,38∗ | 0 | 97,24+0,52∗ | 0 | |
| 0,25 мг/мл | ||||||||
| 3-ОПМ | 87,38±0,62 | 91,53±0,70 | 91,29±0,27 | 0 | 96,00±0,41 | 0 | 97,19±0,38∗ | 0 |
| 0,5 мг/мл | ||||||||
| 3-ОПМ | 91,66+0,67 | 94,57±0,38 | 0 | 95,71±0,33∗ | 0 | 96,88±0,66∗ | 0 | |
| 1,0 мг/мл | ||||||||
| Примечание: ∗ - достоверность различий р<0,05 по сравнению с данными контроля соответствующего срока наблюдения; % -процент эритроцитов, содержание гемоглобина в которых не соответствует норме (норма - 80-l00fl). |
Дополнительное применение 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малата в составе гемоконсерванта «глюгицир» позволяет пролонгировать сроки хранения донорских эритроцитов и снизить уровень деструктивных процессов в хранящейся до востребования эритроцитной массе.
1. Способ консервирования донорской эритроцитарной массы, включающий получение донорской крови, смешивание с гемоконсервантом в соотношении 4:1, разделение донорской крови на плазму и эритроцитную массу, с последующим хранением эритроцитной массы в течение 30 суток при t=+4°С, отличающийся тем, что дополнительно в состав гемоконсерванта глюгицир вводят 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малат.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малат вводят в концентрации 0,5 или 1,0 мг/мл глюгицира.
Похожие патенты:
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу получения минерализованного костного матрикса. Способ получения минерализованного костного матрикса, включающий механическую очистку губчатой кости от хрящевой ткани, перфорацию кости спицей, далее кость последовательно обрабатывают раствором натрия хлорида и твина-100, раствором перекиси водорода, смесью хлороформ-этанол, перемешивают, объем всех используемых растворов составляет не менее 5 объемов губчатой кости, далее обрабатывают спирт-эфирной смесью, перемешивают, все перемешивания проводят на магнитной мешалке, далее центрифугируют и проветривают на воздухе, затем костные фрагменты замораживают, лиофильно высушивают и стерилизуют, при определенных условиях.
Изобретение относится к области медицины, а именно инфектологии и патологической анатомии, и может быть использовано для диагностики телэнцефального глиоза (ТГ) у детей с врожденными инфекциями.
Изобретение относится к области криобиологии, клеточной биологии, морской биотехнологии и гидробиологии. Проводят обработку клеток морских микроводорослей криопротекторной смесью, содержащей проникающий и непроникающий криопротекторы и питательную среду. Осуществляют замораживание с последующим сохранением в жидком азоте. В качестве питательной среды берут стерильную морскую воду при следующем соотношении компонентов, в масс.%: проникающий криопротектор 5-7,5%; непроникающий криопротектор 1,5-3%; стерильная морская вода - остальное. Перед замораживанием проводят инкубацию клеток морских микроводорослей на ледяной бане в течение не менее 10 минут. Замораживание ведут в три этапа: сначала охлаждают до -25°C со скоростью 0,9-1,1°C/мин; затем охлаждают до -75°C со скоростью 2-2,5°C/мин; после чего охлаждают до -196°C, помещая клетки морских микроводорослей в жидкий азот. В качестве проникающего криопротектора можно использовать диметилсульфоксид (ДМСО) или этиленгликоль. В качестве непроникающего криопротектора - трегалозу или поливинилпирролидон (ПВП). Изобретение позволяет повысить выход жизнеспособных, функционально активных клеток микроводорослей после замораживания-оттаивания и восстановить их культуру в течение недели после криоконсервации, обеспечивая при этом возможность количественной оценки функционального состояния микроводорослей. 2 з.п. ф-лы, 1 ил., 3 табл., 5 пр.
Изобретение относится к офтальмологии. Раствор для хранения роговицы содержит смесь биологических сред M199 и DMEM, хондроитина сульфат, L-аланил-L-глутамин, 4-(2-гидроксиэтил)-1-пиперазинэтансульфоновую кислоту (HEPES), пируват натрия, β-гидроксибутират натрия, гентамицина сульфат, амфотерицин В, 2,3,5,7,8-пентагидрокси-6-этилнафталиндион-1,4 (эхинохром А) и гидроксиэтилкрахмал при следующем соотношении компонентов, мас.%: среда M199 0,64; среда DMEM 0,447; гидроксиэтилкрахмал 5-10; хондроитина сульфат 2,5; эхинохром А 0,001-0,01; L-аланил-L-глутамин 0,05425; буфер HEPES 0,5958; пируват натрия 0,0055; β-гидроксибутират натрия 0,151; гентамицина сульфат 0,01; амфотерицин В 0,0000250; дистиллированная вода до 100. Изобретение позволяет увеличить срок хранения роговицы. 1 ил., 1 табл., 1 пр.
Изобретение относится к медицине, ветеринарии и биологии. Проводят фиксацию образца, декальцинацию, промывание водой, дегидратацию в спиртовых растворах и заливку в парафин. Фиксацию образца проводят в течение 24-х часов в молекулярном фиксаторе FineFix на спиртовой основе, содержащем FineFix и 96° спирт в соотношении 1:2,5. Декальцинацию осуществляют в течение 2-5 суток в 5-8% забуференном растворе муравьиной кислоты при ежедневной смене декальцинирующего раствора и контроле полноты декальцинации. Соотношение образец: декальцинирующий раствор составляет 1:20. После завершения декальцинации проводят промывку образца водой и до стадии дегидратации повторно помещают образец в спиртовой раствор молекулярного фиксатора FineFix на 6-12 часов. Набор для приготовления препарата костной ткани содержит молекулярный фиксатор FineFix на спиртовой основе, концентрированный раствор декальцинатора, изготовленный из расчета 40 г лимоннокислого натрия, 100 мл 90%-ного раствора муравьиной кислоты, 300 мл дистиллированной воды и рабочие растворы для контроля полноты декальцинации, содержащие насыщенный раствор оксалата аммония и 25%-ный водный раствор аммиака. Изобретение позволяет получать высококачественные препараты, пригодные для последующего гистологического и иммуногистологического исследования при отсутствии использования высокотоксичных компонентов. 2 н.п. ф-лы, 2 ил.
Единица дозирования в форме прессованной таблетки для замедленного высвобождения средства против насекомых содержит испаряющееся средство против насекомых и инертную твердую основу. Твердая основа содержит двухкомпонентную систему, включающую материал для придания объема и материал, обеспечивающий пористость. Материал для придания объема выбран из группы наполнителей прямого прессования. Материал, обеспечивающий пористость, является карбонатом или бикарбонатом. Устройство подачи средства против насекомых содержит емкость для средства против насекомых. Для получения единицы дозирования ингредиенты смешивают и таблетируют при температуре выше температуры плавления средства против насекомых. Дозатор средства против насекомых содержит единицу дозирования в качестве единственного источника средства против насекомых. Состав находится в форме таблетки, помещенной рядом с нагревателем. Устройство содержит вилку, которая обеспечивает электрическое соединение с нагревателем, и колпак для таблетки, содержащий кожух и крышку. 4 н. и 9 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 пр.
Устройство для консервирования замораживанием клеточных взвесей под давлением в атмосфере инертного газа - портативный криобароконтейнер - выполнен из нержавеющей стали марки 12Х18Н10Е и состоит из передней и задней панелей. На передней панели расположено восемь отверстий для стяжных болтов, а в верхней части имеется винт с толкателем для пережатия трубки пластикового контейнера, через которую заливается клеточная взвесь и подается под давлением инертный газ в стандартный контейнер «Компопласт 300». Контейнер находится в криобароконтейнере, а на задней панели в центральной части расположена ниша, выполненная точно по объему и размерам стандартного пластикового контейнера, а в верхней части имеется канал, по которому проходит трубка от него, а в верхней и нижней частях ниши находятся возвышения. Сверху задней панели расположена петля для подвешивания всего устройства, а по всему периметру задней панели расположено восемь стяжных болтов, закрепленных винтовой нарезкой и сваркой в задней панели. С задней стороны задней панели присоединена основными восьмью стяжными болтами и монтажными винтами задняя стенка. Использование данного изобретения позволяет производить замораживание по различным программам. 2 ил.
Изобретение относится к упаковке для вмещения и хранения жидкого вещества, предназначенного для замораживания. Упаковка (1) для вмещения и хранения жидкого вещества (S), предназначенного для замораживания, содержит две герметизирующие стенки (4, 7), соединенные друг с другом для образования камеры (2) вмещения жидкого вещества (S), одно посадочное место (3), изолированное от герметизирующей камеры (2), для вмещения устройства (T) считывания температуры жидкого вещества (S). Герметизирующие стенки (4, 7) содержат две внешние стенки (4), которые образуют внешние габаритные размеры самой упаковки, опорные стенки (7), разграничивающие посадочное место (3) и выполненные с возможностью образования сквозного отверстия через герметизирующую камеру (2), которая имеет две вмещающие области (2а). Внешние стенки (4) образуют край (5), имеющий впускной зазор (6) для жидкого вещества (S). Опорные стенки имеют пару первых сторон (7а) напротив друг друга и пару вторых сторон (7b) напротив друг друга. Изобретение позволяет повысить надежность считывания температурных данных во время контроля и сертификации. 7 з.п. ф-лы, 2 ил.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, акушерству и гинекологии, и может быть использовано при необходимости сохранения и восстановления репродуктивной функции у женщин с онкологическими заболеваниями. Для этого до проведения курса лучевой и/или химиотерапии лапароскопическим доступом осуществляют забор образцов яичниковой ткани из кортикального слоя с фрагментацией их на части по 2-5 мм2. Из полученных образцов одну часть берут на гистологические исследования, а другую помещают в криопробирки и консервируют в две стадии. При этом в качестве криопротектора на первой стадии используют 10-14% раствор диметилсульфоксида, на второй стадии - 20% раствор 2,5 М сахарозы и 29-32% раствор диметилсульфоксида. При проведении аутотрансплантации образцы яичниковой ткани размораживают с использованием среды Kitazata и оценивают их качество путем гистологического исследования. Непосредственно перед трансплантацией лапароскопическим путем проводят биопсию сохраненных яичников с последующим проведением гистологического исследования. При удовлетворительном результате исследования в кортикальном слое каждого яичника формируют ложе и помещают в них от 5 до 10 фрагментированных размороженных образцов. Затем края ложа смыкают, обрабатывают биологически нейтральным клеем и накладывают клеммы для последующего визуального контроля и оценки динамики роста фолликулов трансплантированной ткани с применением визуальной диагностики. Контроль уровня гормонов проводят один раз в месяц до достижения уровня гормонов на момент забора яичниковой ткани для консервации. Способ позволяет сохранить или восстановить репродуктивную функцию у женщин с онкологическими заболеваниями за счет трансплантации декриоконсервированной овариальной ткани в сохраненные яичники, что обеспечивает адекватную васкуляризацию и приживаемость ткани. 3 з.п. ф-лы, 3 табл., 5 ил., 3 пр.
Изобретение относится к пантовому оленеводству, в частности к консервированию варочной пантовой воды непосредственно на мараловодческой ферме в период панторезной компании. Способ заключается в том, что наряду с термообработкой варочной пантовой воды в качестве консерванта используют листья бадана. Предлагаемое изобретение позволяет в период панторезной компании на мараловодческой ферме сохранять для реализации весь объем варочной пантовой воды без изменения ее органолептических характеристик. 2 з.п. ф-лы, 2 табл., 1 пр.
Изобретение относится к медицине. Биоткань перед ферментативной обработкой помещают в гипертонические растворы хлорида натрия и подвергают воздействию ультразвука в течение 20-300 минут. Затем обрабатывают ферментом террилитином в концентрации 0,1-10 ПЕ на 1 грамм ткани, отмывают в растворе уксусной кислоты и гидрокарбонате натрия, выдерживают в многократно заменяющихся растворах глутарового альдегида возрастающих концентраций и стерилизуют. Изобретение позволяет гарантированно сохранить коллагеново-эластическую структуру биоткани, снизить степень ее минерализации, сократить расход используемых для обработки реактивов, получить неиммуногенный, прошитый по всему объему, биоматериал. 1 з.п. ф-лы, 3 пр.
Изобретение относится к медицине. Проводят получение донорской крови, смешивание с гемоконсервантом глюцир в соотношении 4:1, разделение донорской крови на плазму и эритроцитную массу с последующим хранением эритроцитной массы в течение 30 суток при t+4°С. Дополнительно в состав гемоконсерванта вводят 3-окси-6-метил-2-этилпиридина малат. Изобретение позволяет повысить эффективность защиты клеточных мембран эритроцитов, ограничить процесс гемолиза, предупредить образование микросгустков на поздних сроках хранения эритроцитарной массы. 1 з.п. ф-лы, 6 табл., 5 пр.
В интересах наших пациентов и в соответствии с решением Коллегии Минздрава России и Президиума РАМН от 11.11.2003 "О Концепции развития службы крови в Российской Федерации" Центр крови Минздрава России приступил к выпуску ЭРИТРОЦИТНОЙ ВЗВЕСИ - компонента донорской крови, из которого удалена плазма, а эритроциты содержатся в специальном питательном растворе SAGM (содержит хлорид натрия, аденин, глюкозу и маннитол, растворенные в воде).
Гематокрит эритроцитной взвеси не превышает 0,70, что обеспечивает сохранность эритроцитов и хорошие реологические свойства компонента. Эритроцитную взвесь переливают без предварительного разведения физиологическим раствором. Весь гемоглобин донорской крови полностью содержится в эритроцитной взвеси.
Уникальный биохимический состав взвешивающего раствора обеспечивает сохранность функциональных свойств эритроцитов. Срок хранения эритроцитной взвеси - 42 суток.
При производстве эритроцитной взвеси, кроме мероприятий, гарантирующих качество цельной донорской крови, проводятся дополнительные мероприятия, указанные в таблице.
Таблица
Контроль качества эритроцитной взвеси
При необходимости Центр крови Минздрава России обеспечивает транспортировку эритроцитной взвеси с гарантией соблюдения режима температуры и надлежащих условий хранения.
Выделение эритроцитной взвеси позволяет в максимально возможной степени получить и другие важные терапевтические составляющие донорской крови - плазму и тромбоциты. Приглашаем Вас, всех здоровых людей в возрасте от 18 до 60 лет стать донорами крови.
Эритроцитная взвесь показана для коррекции дефицита газотранспортной функции крови при кровопотере и для терапии анемии.
Эритроцитную взвесь, другие гемотрансфузионные среды, можно заказать и получить имеющиеся в наличии круглосуточно:
тел. 193-75-81 Экспедиция - круглосуточно, тел. 190-99-59 (дополнительный, только в ночное время)
Предварительный заказ и консультации по тел.:
193-77-05 Людмила Георгиевна Калинченко
193-88-94 София Александровна Голосова